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色譜分離柱遇到基線(xiàn)漂移怎么辦
點(diǎn)擊次數(shù):2019 更新時(shí)間:2022-11-10
  色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需要注意下列問(wèn)題,以維護(hù)色譜柱。
  如果你遇到基線(xiàn)漂移,知道是什么問(wèn)題嗎?漂移問(wèn)題主要包括基線(xiàn)漂移和保留時(shí)間漂移。
  1基線(xiàn)漂移
  一般說(shuō)來(lái),機(jī)器剛起動(dòng)時(shí),基線(xiàn)容易漂移,大概要半個(gè)小時(shí)的平衡時(shí)間,如果,你用了緩沖溶液或緩沖鹽,還有就是在低波長(zhǎng)下(220nm)平衡時(shí)間相對(duì)會(huì)比較長(zhǎng),但是,如果你在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)基線(xiàn)漂移,則你要考慮下面的原因:
 ?、僮贤鉄裟芰坎蛔恪?/div>
  解決方法:
  更換新的紫外燈;
 ?、谥鶞夭▌?dòng)。
  解決方法:
  控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,檢查是否有打開(kāi)的窗戶(hù)或空調(diào)對(duì)著柱溫箱。
 ?、哿魍ǔ乇晃廴净蛴袣怏w。
  解決方法:
  用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(最好斷開(kāi)柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
 ?、芰鲃?dòng)相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。
  解決方法:
  檢查流動(dòng)相的組成,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級(jí)的溶劑。
  ⑤樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)(高K'值)以饅頭峰樣被洗脫出,從而,表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線(xiàn)。
  解決方法:
  使用保護(hù)柱,如有必要,在進(jìn)樣之間。在分析過(guò)程中,定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
 ?、迿z測(cè)器沒(méi)有設(shè)定在最大吸收波長(zhǎng)處。
  解決方法:
  將波長(zhǎng)調(diào)整至最大吸收波長(zhǎng)處;
 ?、吡鲃?dòng)相的pH值沒(méi)有調(diào)節(jié)好。
  解決方法:
  加適量的酸或堿調(diào)至最佳pH值;
  2保留時(shí)間漂移
  保留時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志,同一種東西,兩次的保留時(shí)間相差不要超過(guò)15s,超過(guò)了半分鐘可看做保留時(shí)間漂移,就無(wú)法進(jìn)行定性,你要考慮以下原因:
 ?、贉乜夭划?dāng)。
  解決方法:
  調(diào)好柱溫,檢查是否有打開(kāi)的窗戶(hù)或空調(diào)對(duì)著柱溫箱。
 ?、诹鲃?dòng)相比例變化。
  解決方法:
  檢查四元泵的比例閥是否有故障。
 ?、凵V柱沒(méi)有平衡。
  解決方法:
  在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。
  ④流速變化。
  解決方法:
  重新設(shè)定流速。
 ?、荼弥杏袣馀?。
  解決方法:
  從泵中除去氣泡。
  3峰型異常問(wèn)題
  峰型問(wèn)題是液相的主要問(wèn)題,在做液相過(guò)程中,我們就是要變換不同的條件來(lái)改善不好的峰型,對(duì)于各種各樣的異常峰,要區(qū)別對(duì)待,從主要問(wèn)題出發(fā),一個(gè)一個(gè)加以解決。
 ?、偎蟹寰鶠閷挿濉?/div>
  解決方法:
  系統(tǒng)未達(dá)到平衡;
  溶解樣品的溶劑極性比流動(dòng)相差很多;
  色譜柱尺寸及類(lèi)型選擇不正確;
  色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低;
  溫度變化造成的影響。
 ?、谒龇灞阮A(yù)想的小。
  解決方法:
  樣品黏度過(guò)大;進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差;檢測(cè)器設(shè)置不正確,定量環(huán)體積不正確;檢測(cè)池污染;檢測(cè)器燈出現(xiàn)問(wèn)題。
 ?、凵V圖中未出峰。
  解決方法:
  系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解;
  泵未輸液或流動(dòng)相使用不正確;
  檢測(cè)器設(shè)置不正確;
  針對(duì)以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可。
 ?、芤粋€(gè)峰或幾個(gè)峰是負(fù)峰。
  解決方法:
  流動(dòng)相吸收本底高;進(jìn)樣過(guò)程中進(jìn)入空氣;樣品組分的吸收低于流動(dòng)相。
  ⑤所有峰均為負(fù)峰。
  解決方法:
  信號(hào)電纜接反或檢測(cè)器輸出極性設(shè)置顛倒;
  光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡。
 ?、蕹霈F(xiàn)雙峰或肩峰。
  解決方法:
  進(jìn)樣量過(guò)大;樣品濃度過(guò)高;
  保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞;
  保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;
  柱塌陷或形成短通道。
  ⑦前伸峰。
  解決方法:
  進(jìn)樣量或樣品濃度高;
  溶解樣品的溶劑較流動(dòng)。
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